タンパク質精製
タンパク質精製

タンパク質は生物学の要です。自社で構築した組換えタンパク質製品ギャラリーは、キナーゼ、膜タンパク質、ユビキチン化酵素、GTase、加水分解酵素、転写因子など、革新的な医薬品の研究開発に必要なタンパク質を中心としています。リストは随時更新予定で、今後も継続的に新規タンパク質を追加します。また、カスタマイズされたプランの提供も可能です。

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タンパク質純度 >90%

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タンパク質

Custom

カスタマイズ カスタマイズの技術コンサルティング

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タンパク質ファミリー

技術ワークフロー
技術ワークフロー
01
遺伝子合成とプラスミド構築
    • 結晶化、親和性決定、機能研究などの目的に応じた様々な精製タグとプラスミドタイプに対応。
02
タンパク質発現
    • 大腸菌発現系BL21、Rossetta、T7など
    • 昆虫細胞発現系Sf9、Sf21、High Five など。
    • 哺乳類細胞発現系HEK293、CHOなど
    • 他のシステム酵母、無細胞
    • 様々な発現系に適した20種類以上のベクター
    • 次の精製ステップのための20以上の精製タグ
03
タンパク質の精製
    • 統合クロマトグラフィー精製技術:アフィニティー、イオン交換、疎水性相互作用、ゲル濾過クロマトグラフィー
    • ÄKTA浄化装置
    • 90%以上のタンパク質純度を保証
プラスミド構築
プラスミド構築

キャリアタイプ

精製ラベル

pET28a pETDuet-1 pcDNA3.1 pColdTF
pET22b pACYCDuet-1 pFastbac pVB322
pGEX-6p-1 pCDFDuet-1 pFastbacDuet ……
His-GST-PreScission His-strep tag II -PreScission His-protein A GP67-His-sumostar-TEV
His-GST-TEV His-CL7-PreScission thrombin-Fc FLAG-avi
His-TEV His-MBP-pression His-PreScission-strep-TEV His-PreScission-strep-TEV-FLAG
His-PreScission His-sumo-PreScission His-GFP-PreScission mcherry-TEV
His-Trx-PreScission His-TEV-EGFP GP67-His-PreScission .....
His-Dsba-PreScission His-TEV-EGFP-PreScission GP67-His-sumostar-PreScission  
表現システム
表現システム

原核生物発現システム

昆虫発現システム

哺乳類細胞発現システム

酵母発現システム

原核生物発現システム

BL21やRosettaなどの大腸菌株が通常使用されます。。その他枯草菌やストレプトマイセスなどの最近を利用します。

最適な菌株に適合する多様な発現ベクターを保有しています。発現条件やリフォールディングプロセスを常に最適化し、最高の収量パラメータの組み合わせを実現しています。

本システムは、非糖鎖修飾組換えタンパク質、簡易修飾を施した組換えタンパク質、同位体標識タンパク質に対応しています。

 

利点

- 成熟した技術、広く適用範囲、低コスト  

- 迅速な再生産が可能、高発現レベル、実験時間が短い  

- 耐汚染性が高い  

- 発現産物の分離と精製が比較的簡単、安定性が高い  

- 遺伝的背景が明確

昆虫発現システム

バキュロウイルス発現ベクターシステム(BEVS)としても知られる哺乳類細胞に最も近い発現システムです。

当社のマルチシステムおよびマルチベクターによる発現戦略は、従来の発現系で直面するさまざまな課題を克服し、発現効率と品質を最大化します。このシステムは、ウイルスワクチン、シグナル分子、サイトカイン、キナーゼなどに適しています。

 

利点

- 遺伝子容量が大きく、外来遺伝子の発現効率が高い  

- 糖鎖化と広範な翻訳後修飾が可能 

- 組換えウイルスのスクリーニングが用意 

- 可溶性タンパク質の発現に対応

- エンドトキシンフリー

哺乳類細胞発現システム

哺乳類細胞発現系は、翻訳後修飾、タンパク質の立体構造形成、凝集状態などが自然状態に最も近い形で組換えヒトタンパク質を提供します。これにより、活性タンパク質に必要な立体構造や修飾が確実に維持されます。

当社は、独自の哺乳類細胞発現ベクターと多様なトランスフェクション法の組み合わせを保有しており、目的タンパク質に基づいたカスタマイズソリューションを設計することで、発現条件を最適化し、生産量の大幅な向上と実験期間の短縮を実現します。

このシステムは、ワクチン、抗体などに適しています。

 

利点

- 高い発現レベル  

- 正確なタンパク質フォールディングと翻訳後修飾  

- 分泌タンパク質を発現可能

- 懸濁培養の特性により大量生産が可能  

- エンドトキシンフリー

酵母発現システム

酵母発現系は、出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)発現系と、メタノール資化性酵母発現系に大別されます。後者にはPichia pastoris(ピキア・パストリス)などが含まれ、現在最も広く使用されている酵母発現システムです。

当社では、独自のベクターと宿主の組み合わせを活用することで、組換えタンパク質の発現量および品質を大幅に向上させ、実験サイクルを短縮することが可能です。

このシステムは、分泌タンパク質、簡易修飾を施した組換えタンパク質、同位体標識タンパク質などに適しています。

 

利点

- 短サイクル、低コスト、高効率  

-タンパク質の翻訳後修飾やプロセシングにも対応  

- 分泌型タンパク質の発現に適している  

- エンドトキシンフリー

技術精製
技術精製

精製対象となるタンパク質の特性およびサンプル中に含まれる主要な不純物を理解することが重要です。

タンパク質の由来、性質(分子量、等電点など)、および安定性(温度、極端なpH、プロテアーゼ、酸素、金属イオンに対する耐性)を踏まえ、最適なタンパク質精製戦略を設計します。

高圧低温ホモジナイゼーション

細胞回収後、液体のせん断力を利用して大規模に細胞破砕を行い、後続の精製に用いる細胞内容物を得ます。

ゲルろ過クロマトグラフィー

サイズ排除クロマトグラフィーまたは分子ふるい法とも呼ばれます。この手法は、分子量の違いに基づいて成分を分離する技術です。操作条件は比較的穏やかで、有機溶媒を必要としません。

アフィニティクロマトグラフィー(親和性クロマトグラフィー)

生体分子間の特異的な相互作用を利用してタンパク質の分離・精製を行う手法です。アフィニティ担体上のリガンドが、特定の相互作用を持つ物質のみを選択的に結合させます。

高い選択性・高純度・迅速性が特長であり、組換えタンパク質の精製においては最初のステップとしてよく用いられ、ほとんどの不純物を除去できます。

イオン交換クロマトグラフィー

タンパク質ごとに等電点が異なるため、pH条件を調整することで、それぞれ異なる電荷を帯びます。これを利用して、タンパク質の電荷特性に応じたイオン交換カラムを選択します。

この手法は可逆的かつ制御性が高く、他の精製法と組み合わせて最終精製ステップで使用されることが多いです。

疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)

タンパク質の疎水性特性に基づいて精製を行うクロマトグラフィー法です。高イオン強度条件下では、タンパク質と担体間の疎水性相互作用が強まり、タンパク質が担体に吸着します。

その後、移動相のイオン強度を低下させることで相互作用が弱まり、目的のタンパク質を溶出・回収することができます。

ケーススタディ
ケーススタディ