MST

タンパク質Bと金属イオンFe³⁺およびCu²⁺との親和性評価

 

技術的課題

Fe³⁺およびCu²⁺は分子量が非常に小さいため、SPR(表面プラズモン共鳴)法によって得られるデータの質が低くなってしまう。

 

解決策

リガンドの分子量に制限されないMST法を使用。

PBS緩衝液をBis-Tris緩衝液に置換することで、Fe³⁺およびCu²⁺との不要な相互作用を防ぎ、実験結果への影響を回避。

各溶液のpHを約8.0に調整し、金属イオン濃度の変動によるpH変化を抑制。また、高濃度条件での金属溶液の沈殿を防ぐことで、測定への悪影響を防止。

 

結果

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